Auteurs: Guillaume Serin, Violette Thermes, Frédéric Vincent, Jochen Wittbrodt, Jean-Stéphane Joly, Philippe Genne
Résumé : prolifération cellulaire et apoptose. Une perte d’équilibre entre la prolifération cellulaire et l’apoptose entraîne le cancer. Objectifs du 5ème Projet Européen PCRD EAC – Embryos Against Cancer – étaient i) d’identifier de nouvelles protéines médaka (orizias lapizes) inconnues impliquées dans ces deux mécanismes cellulaires au cours de la morphogenèse de l’embryon et ii) d’estimer l’intérêt de leur homologue humain comme cibles pour une thérapie anticancéreuse. L’analyse à haut débit d’une collection de modèles d’hybridation, construite avec la bibliothèque d’ADNc de Medaka (Oryzia latipes), a permis la caractérisation de plusieurs nouveaux gènes hautement exprimés dans des domaines dédiés de prolifération cellulaire intense, localisés dans le tectum optique ou la rétine en cours de développement. L’humain
les homologues de ces gènes ont été analysés via un processus de validation pour leur rôle dans la prolifération des cellules cancéreuses. Premièrement, leur expression d’ARNm a été évaluée à partir d’un panel de tumeurs primaires et de lignées de cellules tumorales. Nous avons également testé si la réduction de leur expression par interférence ARN modifiait le taux de prolifération cellulaire ou induisait l’apoptose. En cas de résultat positif, nous avons isolé l’ADNc humain, observé les effets de surexpression sur la prolifération et caractérisé les partenaires protéiques.
L’un de ces gènes, Simplet, est directement impliqué dans les mécanismes de prolifération cellulaire : l’injection d’antisens morpholino dans l’œuf de médaka a provoqué un retard de la division cellulaire, des défauts de gastrulation et un phénotype apoptotique, conduisant finalement à la mort embryonnaire. hSimplet (FAB53) est exprimé dans les cellules tumorales.
Le dépistage Y2H et les tests de co-immuno-précipitation ont montré que hSimplet interagit avec la protéine 14-3-3, un gène suppresseur de tumeur important (Development, 2006, 133 : 1881-90).